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一、亮度法

1.原理

血清中游离脂肪酸经抽提到高密度铜试剂中,形成铜皂在上层溶剂中,再用二苯卡巴肼与铜显色,进行定量。

2.试剂组成

代号种类浓度组成贮存2~8℃有效期R-1抽提剂氯仿:庚烷:甲醇=5:5:1(V/V)R-2缓冲液33mmol/LKH2PO44.539g/L 100ml+Na2HPO4·2H2O5.983g/l 50ml调pH至6.4R-3铜贮液500mmol/LCu(NO3)2·3H2o 12.07g加H2O→100mlR-4三乙醇胺1.0mol/L三乙醇胺10ml,加水→100mlR-5NaOH液1mol/LR-6铜试剂R-3 10ml+R-4 10ml+R-6 6ml
+H2O→100ml调pH至8.1R-7二苯卡
巴肼液二苯卡巴肼(乙醇)液(4g/L)10ml+R-4 0.1ml临用前配制R-8软脂酸标准贮存液2mmol/L软脂酸51.2mg溶于100ml R-1液冷藏R-9R-8的应用液500μmol/L用R-1液稀释冷藏

3.操作

按图15-7操作。

4.计算

血清游离脂肪酸(μmol/L)=ESA/EST×500

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