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四、血清Lp(α)测定法

1.原理

血浆(清)中脂蛋白(α)(Lp(α))与Lp(α)的单克隆抗体(鼠)结合形成抗原抗体免疫复合物,有浊度改变,测定溶液界质中混浊度的光密度改变,求其血浆中Lp(α)的含量。

Lp(α)+抗人Lp(α)→抗原抗体复合物→测定光密度

2.试剂与仪器

试剂(第一化学);Lp(α)缓冲液(R1);Lp(α)抗体液(R2)。

仪器:生化分析仪(以CL-7200型为例)

3.操作方法

以△A=A2-A1进行运算Lp(α)浓度。

4.定标:

取Lp(α)定值液,用0.9%NaCl液稀释。

采用上述操作步骤,按免疫测定法定标,其操作方法及标准曲线如图16-3所示。

Lp(α)免疫测定法的反应过程光密度变化值mAbs(A)及其检测的标准曲线图

图16-3 Lp(α)免疫测定法的反应过程光密度变化值mAbs(A)及其检测的标准曲线图(B)(CL-7200型)

上机参数(以CL-72OO型为例)

名称LPA名称LPA测定方法Endpoint标准(1)0.72标本量16μl标准(2)1.44R1试剂量280μl标准(3)2.88R2试剂量40μl标准(4)5.75反应时间第一波长5min标准(5)11.5第二波长4.99min波长1.2[340][750]

5.注意事项:

(1)操作时,标本和试剂无需处理;

(2)血浆或血清标本均可检测。标本置2~21℃保存1周不变;

(3)标本浓度超过定标最高值时,应用生理水稀释后再测;

(4)抗体试剂(R1)避免反复接触;

(5)测定时避免日光直接照射。

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