免疫细胞化学在细菌学中主要用于菌种鉴定和抗原结构的研究。细胞都各自有其特异性抗原,应用特异性抗体的荧光素或酶标记物,可以鉴定任何一种细菌。已经成功地用于鉴定几乎所有致病菌的纯培养。尤其是应用免疫荧光技术具有较其他血清学方法简便、快速和敏感等优点,并能直接进行细菌形态观察。可用于鉴定的材料也比较多样,如培养物、感染组织、病人分泌排泄物,外环境中采集材料(土壤、水、杂物等)。由于此法对某些传染病原能较常规方法作出更快速的诊断,因而具有特殊意义。
免疫细胞化学方法用于研究细菌抗原结构和形态学观察,由于单克隆抗体的应用,比其他方法更为有效。
图16-1 免疫荧光在病原细菌诊断程序中的应用时机
从患者咽部粘膜用棉拭子取标本,作涂片用甲组溶血性链球菌荧光抗体染色,能够很快作出诊断。对于痢疾杆菌、霍乱孤菌、布氏杆菌、炭疽杆菌和脑膜炎双球菌、肺炎双球菌等的实验诊断均有较好的效果(如表16-1)。
利用间接免疫荧光或酶标记抗体法,检测患者血清中的抗体更有价值,广泛用于临床诊断和流行病学研究。
表16-1 免疫荧光细胞化学方法在细菌诊断中的应用评价
菌种疾病标本方法敏感性特异性意义甲组链球菌急性咽峡炎
猩红热咽部培养物DIF高高诊断急性风湿热乙组链球菌新生儿败血症阴道拭子DIF高中快速脑膜炎临床标本鉴定牛型乳腺炎培养物致病性大肠杆菌婴儿腹泻大便DIF高中过筛杆菌伤寒沙门氏菌肠伤寒大便DIF高高诊断沙门氏菌肠炎大便DIF高高诊断(大多数血清型)肠热脑膜炎食品过筛环境标本培养物志贺氏菌属宋内氏菌菌痢大便DIF高高快诊福氏菌菌痢大便DIF高高快诊百日咳杆菌百日咳鼻咽涂片DIF高高快诊流感嗜血杆菌细菌性脑膜炎脑脊髓DIF高高快诊肺炎球菌细菌性脑膜炎脑脊髓DIF高高快诊脑膜炎球菌细菌性脑膜炎脑脊髓DIF高高快诊出血点(差)军团菌病小叶肺炎痰,肺渗出物DIF高高诊断肺组织切片IIF快诊李氏菌李氏单核细胞体液涂片DIF高高诊断增多症组织切片布氏杆菌布氏症胎盘DIF高高诊断(牛、羊、猪型)(人、畜)病理组织培养物DIF高高诊断结核杆菌结核病痰及其消化液DIF高高诊断胎儿孤菌孤菌病子宫阴道粘液DIF高中诊断类丹毒菌动物感染血液、组织、培养物DIF较高高诊断放线菌放线菌病扁桃腺病理排泄物DIF高高诊断钩端螺旋体钩体病尿沉渣,新鲜组织刮片或切片培养物DIF中高诊断奈瑟氏淋球菌淋病结膜、皮肤破损,关节 液DIF较高中过筛绿脓杆菌肺炎病理组织DIF较高中诊断类鼻疽杆菌类鼻疽排泄物DIF高高诊断病理组织DIF中高诊断马疽杆菌鼻疽排泄物DIF高高早诊病理组织脆弱类杆菌败血症血及其他有关临床标本DIF高较高诊断黑色素源标菌牙周病物病变部位分泌物DIF高高辅诊脏器脓肿梭状芽胞杆肉毒中毒食物DIF菌属动物黑腿病变部组织羊炭疽大便等DIF高较高辅诊或诊断气性坏疽破伤风结肠炎等沙眼衣原体沙眼结膜刮片DIF高高诊断
(引自,黄策:免疫荧光和荧光免疫。1983)